

上海一研生物科技有限公司
主營產品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學試劑盒
庫蚊通用PCR檢測試劑盒
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清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 |
庫蚊通用PCR檢測試劑盒 | Culex spp.PCR | 50T |
普通PCR反應流程:
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
反應五要素:
庫蚊通用PCR檢測試劑盒參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
5.4 反應管中加好所有的試劑后,應盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養2-3天后送樣檢測。
西酞普蘭相關物質B標準品 現貨促銷 規格: Human high mobility group box-1 protein ELISA Kit
西酞普蘭相關物質C標準品 現貨促銷 規格: human T4 ELISA KIT
西酞普蘭相關物質D標準品 現貨促銷 規格: 62498-67-3human U-TSH ELISA KIT
西酞普蘭相關物質E標準品 現貨促銷 規格: Human Hepatocyte growth factor ELISA kit
西酞普蘭相關物質F標準品 現貨促銷 規格: 55011-89-7Human Stem cell factor receptor,SCFR ELISA kit
環丙沙星標準品 現貨促銷 規格: 85721-33-1Human IP-10 ELISA Kit
環丙沙星乙二胺同系物標準品 現貨促銷 規格: Human Interferon gamma ELISA Kit
鹽酸環丙沙星標準品 現貨促銷 規格: 86393-32-0Human Interferon α ELISA Kit
環丙沙星相關物質A標準品 現貨促銷 規格: Human secretory IgA ELISA Kit
順鉑標準品 現貨促銷 規格: 15663-27-1Human DPP4 ELISA Kit
檸檬酸標準品 現貨促銷 規格: 77-92-9Human catecholamine ELISA Kit
克拉霉素標準品 現貨促銷 規格: 81103-11-9human dopamine ELISA KIT
克拉霉素有關物質A標準品 現貨促銷 規格: 81103-14-2Human telomerase ELISA Kit
克拉霉素鑒別用標準品 現貨促銷 規格: 81103-11-9human AZT ELISA KIT
克拉維酸-2-羧酸鉀標準品 現貨促銷 規格: Human Rantes ELISA kit
克拉維酸鋰標準品 現貨促銷 規格: 61177-44-4Human Factor VIII-related Antigen ELISA Kit
庫蚊通用PCR檢測試劑盒大鼠脂聯素(ADP)Elisa Kit(化學發光免疫分析法)Prochlorperazine Maleate 100mg
大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)Elisa Kit(化學發光免疫分析法) Procarbazine Hydrochloride 1g
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)Elisa Kit(化學發光免疫分析法)Procaine Hydrochloride 100mg
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)Elisa Kit(化學發光免疫分析法)Procainamide Hydrochloride 100mg
大鼠脂蛋白α(Lp-α)Elisa Kit(化學發光免疫分析法)Probucol 5mg
大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)Elisa Kit(化學發光免疫分析法) Probenecid 1g
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)Elisa Kit(化學發光免疫分析法) Primidone 1g
大鼠載脂蛋白E(Apo-E)Elisa Kit(化學發光免疫分析法)Primaquine Phosphate 250mg
