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大鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物【Rat Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes Derivatives】
產品描述：大鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物是從大鼠原代胎兒表皮角質形成層細胞提取的，大鼠原代胎兒表皮角質形成層細胞從正常大鼠胚胎組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。             

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證產品的質量。     

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。            潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。產品僅供科研使用

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項：
1. 接收到大鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
產品僅供科研使用2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。
以下是公司正在熱銷的產品：
蛋白電泳尼羅紅染色試劑盒20 硫酸安普霉素(標準品)  Apramycin sulfate  質量規格：含量測定

蛋白電泳伊紅黃色染色試劑盒10 硫酸阿米卡星,硫酸丁胺卡那霉素  Amikacin Sulfate   質量規格：含量674-786ug /mg,USP30

蛋白定量樣品預處理試劑100 硫酸阿米卡星(標準品)  Amikacin Sulfate   質量規格：效價測定

蛋白定量樣品預處理試劑100 硫酸阿巴卡韋  Abacavir Sulfate 

蛋白定量樣品預處理試劑100 硫秋水仙苷 HPLC≥98% 20mg

蛋白活性穩定液10毫升 硫普羅寧,N-(2-巰基丙酰)甘氨酸  Tiopronin  質量規格：>99%,BR

蛋白激酶譜系完全分析技術試劑盒5 硫普羅寧（標準品）  Tiopronin  質量規格：含量測定

蛋白激酶系列高通量篩選熒光檢測試劑盒500 硫鏈絲菌素  Thiostrepton from Streptomyces azureus  質量規格：>90%,進分

蛋白酶/0酸酶完全抑制混合液抑制蛋白破壞性生物酶活性 硫康唑  Sulconazole 

蛋白酶抑制劑混合液保留細胞內成分活性A、動物細胞B、細菌C、酵母菌D、植物 硫堇(>90%,BS)  Thionin  質量規格：>90%,BS
Chymoypsin 可溶性淀粉  Starch soluble  質量規格：BR

MouseMucin-7,MUC7ELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒規格：96T/48T 醋酸鋰，二水(AR)  Lithium acetate dihydrate  質量規格：>99%,AR

小鼠皮質酮(CO)ELISA試劑盒 ，英文名： CO ELISA Kit 聚蔗糖400  Ficol 400  質量規格：>98%,BR

人維生素B6(VB6)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminB6,VB6ELISAKit 96T/48T 二硝基水楊酸  3,5-Dinitrosalicylic acid  質量規格：>98%,BR

大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)試劑盒 Rat Mucin-1,MUC1 ELISA kit 丙二酸鈉   malonate  質量規格：>98%

英文名稱HumanFLT3ELISAKIT人FMS樣酪氨酸激酶3(FLT3)規格：96T/48T 二氫鈉二水   phosphate, monobasic, dihydrate  質量規格：>98.5%,分子生物學級

動物組織微粒體組分分離試劑盒50 丙二酸(AR)  Malonate  質量規格：>99.5%,AR

ELISAKitC3兔補體蛋白3規格：48T/96T 氯化錳四水  Manganese (II) chloride, tetrahydrate  質量規格：>98%

小鼠皮質醇結合球蛋白(CBG)ELISA試劑盒 ，英文名： CBG ELISA Kit 干酪素  Casein  質量規格：BR

人維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminC,VCELISAKit 96T/48T 醫用凡士林  Vaseline  質量規格：BR
大鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物小鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT1 ELISA Kit 硫黃素 T(>75%,BS)  Thioflavin T  質量規格：>75%,BS

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測試劑盒MouseAngiopoietin2,ANG-2 96T/48T 硫藤黃素(>95%,BC)  Thiolutin from Streptomyces luteosporeus  質量規格：>95%,BC

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-2 ELISA Kit 硫堇(>90%,BS)  Thionin  質量規格：>90%,BS

小鼠血管生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit 硫代水楊酸(>98%,BR)  Thiosalicylic acid  質量規格：>98%,BR

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 硫鏈絲菌素  Thiostrepton from Streptomyces azureus  質量規格：>90%,進分

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA檢測試劑盒MouseAngiopoietin4,ANG-4 96T/48T 吐啉(>90%,Ind Grade)  Thorin  質量規格：>90%,Ind Grade

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-4 ELISA Kit 胸腺嘧啶(>99%,BR)  Thymine  質量規格：>99%,BR

小鼠血管生成素4(ANGPT4)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT4 ELISA Kit 特泯菌  Timentin  質量規格：BC

小鼠血管生成素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGⅡ ELISA Kit 草酸亞錫(>98%,BR)  Tin (II) oxalate  質量規格：>98%,BR

小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA檢測試劑盒Mouseangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1 96T/48T 二氧化錫(> 99%,BR)  Tin (IV) oxide  質量規格：> 99%,BR
操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。