

小鼠骨骼肌細胞提取物
價格
訂貨量(株)
¥2800.00
≥1
店鋪主推品 熱銷潛力款
잵잯재잭잴잯잯잯잱잳잰
在線客服
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。產品僅供科研使用
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
小鼠骨骼肌細胞提取物【Mouse Muscle: Normal Skeletal Muscle Cell Derivatives】
產品描述:小鼠骨骼肌細胞提取物是從小鼠骨骼肌細胞提取的,小鼠骨骼肌細胞從正常小鼠骨骼肌組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
小鼠骨骼肌細胞提取物 | Mouse Muscle: | GOY-Y6675 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅供科研使用
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
以下是公司正在熱銷的產品:
貓星形腦膠質細胞;PG-4(S+L-)苯并[a]蒽(>98.0%(GC))Benz[a]anthracene質量規格:>98.0%(GC)
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細胞裂解液 (陽性對照) 1H-環五[l]菲(>95.0%(GC))1H-Cyclopenta[l]phenanthrene質量規格:>95.0%(GC)
人前列腺平滑肌細胞完全培養基 100mL9-氨基喜樹堿9-Aminocamptothecin
A-431細胞,人表皮癌細胞 流感嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(R)-7-乙基喜樹堿(R)-7-Ethyl Camptothecin
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標簽)7-乙基-喜樹堿-d37-Ethyl-d3-camptothecin
穩定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E外消旋5-羥甲基去異丙基托特羅定-d6rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 外消旋去異丙基托特羅定rac Didesisopropyl Tolterodine
人腎管狀上皮細胞完全培養基 100mL外消旋5-羥甲基托特羅定rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine
B16F1細胞,小鼠色素瘤細胞 MRC-5(胚肺細胞) Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33外消旋5-羧基去異丙基托特羅定rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine
CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標簽)S-(-)-托特羅定S-(-)-Tolterodine
人前列腺平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA乳糖-明膠培養基10克RT
EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 放現菌速 D cCTINOMYCIND
雜交瘤(B類);C3110D2B2化乙酰膽堿 (培養... Acetylcholine chloride (cell culture t... 60-31-1 25G 核酸衍生物
BT549細胞,管癌細胞 人喉癌細胞,M4e細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)DEXTRAN葡聚糖(分子量10000)試劑級白色粉末RTsigma
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4(葉酸
小鼠骨骼肌細胞提取物人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7 大鼠表皮角化細胞完全培養基 100mLAcrylylchloride錄化酸25克BR,98%
DH82 狗腎惡性組織細胞增生癥細胞2-基;虧哪啶;鄰基;α-基;2-基氮雜 2-Mqthylinoneolinq;inonecldinq;α-Mqthylinoneolinq;Chincldinq
KLK4 Others Human 人 KLK-4 / Kallikrein-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-MU4-甲基傘形酮100克試劑級,92%
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19BORICACID硼酸蛋白組學級500GRT
TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二甲基巴比土酸NA
注意事項:
1. 接收到小鼠骨骼肌細胞提取物,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
