v> 背景:
在體內,基底膜是以細胞為基礎的薄層細胞外基質。ABW? Matrigengel 無
酚紅基底膜基質低生長因子是一種可溶性的基底膜制劑,這種基質是
通過基因編輯技術將多種表達膠原蛋白的基因序列插入到經永生化
處理的小鼠子宮肌瘤細胞系中,并在實體腫瘤中抽提出來的。它的主要
成分是層粘連蛋白,接著是膠原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋
白1,2。ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子也含有轉化生長因
子 β、表皮生長因子、類胰島素生長因子、成纖維細胞生長因子、組織纖
溶酶原激活物3,4 和 在 腫 瘤 中 自 然 出 現 的 其他 生 長 因 子 。 ABW?
Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子對正常和變換的錨著依賴性
上皮樣細胞和其他細胞類型的附著和分化是有效的。這些細胞類型包括
神經元5,6、肝細胞7、支持細胞8,9、小雞晶狀體上皮細胞10 和血管內皮細胞11。
在成年大鼠肝細胞12,13、血管內皮細胞 14 以及小鼠15-18 和人19,20 乳腺上皮
細胞的三維細胞培養中ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子會
影響基因的表達。這是幾種類型腫瘤細胞侵襲的基礎21,22,支持體內
末梢神經再生23-25,并提供體外26,27 和體內25,28-30 血管再生研究的必需
底物。ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子也支持在免疫抑
制小鼠中人類腫瘤的增殖31-33。ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低
生長因子能用于未分類乳腺細胞的移植34, 以及分類的上皮細胞亞群嵌
入ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子35,36。這一基質也被用
作為癌癥干細胞模型并被證明在體內能增強腫瘤生長速率37。
來源:
經基因編輯的小鼠子宮肌瘤細胞
制劑:
達爾伯克改良伊格爾培養基和 50 μg/mL 慶大霉素。ABW? Matrigengel 無
酚紅基底膜基質低生長因子適合所有的培養基。
儲存:
儲存在-20℃ 時是穩定的。通過分裝并一次性使用分裝物來最小化產品的
凍融。在-20℃ 冰箱中儲存分裝物直到準備使用。請不要儲存在無霜冰箱
中。請保持產品的凍結。
有效日期:
ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子的有效日期是批次特異
的,您可以在產品的分析證明書中找到,在-20℃ 條件下能儲存24個月以
上。
警告:
因為ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子在10℃ 以上會
開始凝膠化,所以極其重要的是ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質
低生長因子和所有的進入與ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生
長因子接觸的培養皿或培養基都 應 該 預 冷 。 在 實 驗 的 全 部 過 程 中
請 保 持 ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子處 于 冰
上。
重構和使用:
在ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子小瓶凍融的過程中可能上海諾娃醫藥科技有限公司
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會發生顏色的變化,由于二氧化碳和碳酸氫鹽緩沖液以及酚紅的作用,顏色會從淡黃色變化到深
紅色。顏色的變化是正常的,不會影響產品的功效,顏色將會在5%CO2 平衡下消失。
請將小瓶淹沒在冰中并放置在 4℃ 冰箱里過夜解凍 ABW? Matrigel? 基質。一旦ABW?
Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子被解凍,請渦旋小瓶以確保材料的均勻分散。請將
ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子全程保持在冰上。請使用無菌技術處理。請將
解凍的ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子放置在無菌的區域,在小瓶的頂部噴灑
70% 的乙醇并風干。
使用預冷的移液管輕柔的吸取ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子以確保其均
勻性。將ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子分裝到離心管中,每當ABW?
Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子堵塞吸頭和/或移液管測量不精確時請更換吸頭。如果
將材料放置在 4℃ 的冰上 24-48 個小時,凝膠化的ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生
長因子可能會被重新水化。
ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質低生長因子可以被用來作薄層凝膠(0.5 mm),細胞可以
接種在其頂部。當作為 1 mm 凝膠層使用時,細胞也可以在ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基
質低生長因子的內部培養。大量的稀釋將會導致 1 個薄的、非凝膠化的蛋白層。這對于細胞附
著是有用的,但是在分化研究中可能不起作用。