支原 體 檢測試劑盒(PCR方法)
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支原-體-檢測試劑盒(PCR方法)

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貨號 ZK-PL4008
規格 50次
包裝
品牌 子科生物ZIKER
保存條件 -20度
保質期 有效期12個月
廠家 子科生物
產地 深圳
商品介紹

支原體檢測試劑盒(PCR方法)

貨號:ZK-PL4008

品牌:子科生物/ZIKER

描述

支原體污染已經成為細胞培養中高度重視的問題,因此定期進支原體污染檢測十分必要。本試劑盒采用PCR方法,能特異性檢測各種培養細胞生物材料(如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等)中支原體的污染。試劑盒使用的混合引物針對支原體 16s rRNA 序列保守區域設計,可直接使用細胞培養液作為 PCR 模板,特異性擴增支原體DNA,搭配配套的 Mix組分,一小時內即可完成,靈敏度高,可檢測低20個拷貝的支原體。


效期:有效期12個月


儲存與運輸冰袋(wet ice)運輸;-20℃保存


組成:

PCR Mix(2×)

1 mL

Primer Mix

100 μL

Positive Control

50 μL

Free Water

1 mL

操作步驟
1. 樣品準備:取適量待檢細胞培養上清于潔凈的PCR 管中,利用 PCR  95℃熱處理5 min后作為模板。血清樣本可用Free  Water 稀釋后,取適量樣本于潔凈的PCR管中,利用PCR儀95℃熱處理 5min 后作為模板;
2. PCR 體系配制每次實驗需設置陰性對照( 1μL待檢樣品換成等量的Free  Water)與陽性對照(在1μL待檢樣品中加入0.5μL Positive Control 后一起作為Template),實驗時戴一次性口罩與手套,謹慎操作,防止操作不當引入外源支原體污染;

Component

Volume

Template

1 μL

Primer  Mix

2 μL

PCR Mix(2×)

10 μL

Free   Water

To 20 μL


3. PCR 
程序設置

Step

Temperature

Time

Cycles

Initial Denaturation

98℃

2 min

1

Denaturation

98℃

20 s

30

Annealing

56℃

25 s

Extension

72℃

10 s

Final extension

72℃

5 min

1

Hold

4-16℃

Forever

4. 凝膠電泳:取10μL PCR 產物,使用 1%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測;
5. 結果分析:每次實驗通過與陰性對照、陽性對照檢測結果比較確認樣品支原體污染情況,陽性條帶大小500 bp左右。如陰性對照檢測結果中有條帶很有可能是PCR體系中出現污染,建議重新實驗確認結果。如有必要,也可對PCR產物進行常規測序,以確定具體的支原體種屬。



注意事項
1. 本試劑盒可以檢測M.orale,M.arginini,M.bovis,M.fermentans,M.gallisepticum,M.hominis, M.pirum,Ureaplasmaspp,M.hyorhinis,M.pneumoniae,A.laidlawii等至少 11 種以上支原體污染。
2. 所有試劑在使用前于冰上徹底解凍、混勻,使用完畢后于-20℃保存。
3. 每次實驗必須設置陰性對照、陽性對照,實驗組建議設置樣品模板梯度。
4. 操作時必須佩戴口罩,嚴格按照 PCR 操作標準,防止引入外源污染影響實驗結果。
5. 為了確保細胞實驗的可靠性及穩定性,建議定期進行支原體污染檢測。
6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


聯系方式
公司名稱 深圳子科生物科技有限公司
聯系賣家 白萱萱 (QQ:373419706)
電話 钳钶钴钹钷钸钸钵钵钺钼
手機 钳钻钺钹钼钷钵钳钼钸钼
傳真 钺钵钼钼-钸钳钸钺钼钻钳钵
地址 廣東省深圳市
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