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拉曼光譜儀的工作原理

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當(dāng)一束頻率為v0的單色光照射到樣品上后，分子可以使入射光發(fā)生散射。大部分光只是改變光的傳播方向，從而發(fā)生散射，而穿過分子的光的頻率，仍與入射光的頻率相同，這時，稱這種散射稱為瑞利散射；還有一種散射光，它約占總散射光強度的 10^-6～10^-10，該散射光不僅傳播方向發(fā)生了改變，而且該散射光的頻率也發(fā)生了改變，從而不同于激發(fā)光（入射光）的頻率，因此稱該散射光為拉曼散射。在拉曼散射中，散射光頻率相對入射光頻率減少的，稱之為斯托克斯散射，因此相反的情況，頻率增加的散射，稱為反斯托克斯散射，斯托克斯散射通常要比反斯托克斯散射強得多，拉曼光譜儀通常大多測定的是斯托克斯散射，也統(tǒng)稱為拉曼散射。散射光與入射光之間的頻率差v稱為拉曼位移，拉曼位移與入射光頻率無關(guān)，它只與散射分子本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)。拉曼散射是由于分子極化率的改變而產(chǎn)生的（電子云發(fā)生變化）。拉曼位移取決于分子振動能級的變化，不同化學(xué)鍵或基團(tuán)有特征的分子振動，ΔE反映了能級的變化，因此與之對應(yīng)的拉曼位移也是特征的。這是拉曼光譜可以作為分子結(jié)構(gòu)定性分析的依據(jù)

拉曼光譜儀使用方法

使用方法 一、開機測樣 1、打開計算機和拉曼儀器，預(yù)熱大約1小時； 2、打開計算機桌面上的程序操作界面，口令是“OPUS”； 3、點擊測樣圖標(biāo)，在基本設(shè)置中調(diào)入所測試樣的種類并調(diào)節(jié)激光強度；在設(shè)置中更改名稱和更改保存路徑并設(shè)置掃描次數(shù)和時間，根據(jù)樣品類型自行選擇分辨率； 4、裝樣；(注意不可以污染鏡片) 5、樣品檢測：選中拉曼光譜圖，待出現(xiàn)預(yù)覽譜圖后，前后調(diào)節(jié)樣品座位置(點擊Forward?和?backward)到峰值顯示zui大幅度； 6、回到基本設(shè)置點擊樣品測試開始測試樣品。 二、譜圖處理 1、譜圖處理：點擊放大圖標(biāo)將譜圖放大，基線校正，標(biāo)峰位，點擊打印-新建打印模板，將左側(cè)顯示欄中的*個譜圖圖標(biāo)拖入模板，再將第二個峰值圖標(biāo)拖入模板，在模板空白處新建一個表格，將峰值圖標(biāo)拖入表格中，剪切掉模板中多余部分包括Bruker標(biāo)志（在空白處右擊顯示屬性-范圍-顯示Bruker標(biāo)志）； 2、保存譜圖：右擊-，選中zui后一項；打開寫字板，黏貼，保存寫字板； 3、保存數(shù)據(jù)：選中左側(cè)顯示欄圖標(biāo)，右擊-顯示參數(shù)-Raman，數(shù)據(jù)，黏貼到寫字板。 三、關(guān)機 1、先關(guān)閉計算機，再關(guān)閉插座(即關(guān)閉激光)； 2、關(guān)閉左側(cè)儀器背面開關(guān)按鈕，拔掉插頭。

拉曼光譜儀在各領(lǐng)域的應(yīng)用

1、拉曼光譜在化學(xué)研究中的應(yīng)用

拉曼光譜在有機化學(xué)方面主要是用作結(jié)構(gòu)鑒定和分子相互作用的手段，它與紅外光譜互為補充，可以鑒別特殊的結(jié)構(gòu)特征或特征基團(tuán)。拉曼位移的大小、強度及拉曼峰形狀是鑒定化學(xué)鍵、官能團(tuán)的重要依據(jù)。利用偏振特性，拉曼光譜還可以作為分子異構(gòu)體判斷的依據(jù)。

2、拉曼光譜在生物學(xué)研究中的應(yīng)用

拉曼光譜是研究生物大分子的有力手段，由于水的拉曼光譜很弱、譜圖又很簡單，故拉曼光譜可以在接近自然狀態(tài)、活性狀態(tài)下來研究生物大分子的結(jié)構(gòu)及其變化。