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牛腹瀉粘膜病毒抗原(BVDV Ag)ELISA檢測試劑盒實驗原理：

試劑盒采用夾心酶免法，采用了兩種高特異性抗體，TMB作為著色劑，最終溶液所顯示的顏色強度與樣品中指標的量成正比

檢測范圍：參考說明書

使用前，所有樣品應平衡至室溫，大約30min，然后充分混勻，確保試劑質量無變化，標準曲線和樣品檢測同時進行

試劑	檢測樣品	標準品	檢測樣品對照孔	試劑對照孔
	檢測樣品100ul	稀釋標準品（1-7管）100ul	EIA緩沖液（第8管） 100ul	EIA緩沖液100ul
蓋板，37℃下孵育60min
洗板7次
酶標抗體	100ul	100ul	100ul	-
蓋板，4℃下孵育30min
洗板9次
顯色劑	100ul	100ul	100ul	100ul
室溫避光溫育30min
終止液	100ul	100ul	100ul	100ul
加終止液后30min內450nm處讀取OD值

牛腹瀉粘膜病毒抗原(BVDV Ag)ELISA檢測試劑盒操作步驟：
1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

牛腹瀉粘膜病毒抗原(BVDV Ag)ELISA檢測試劑盒自備物品：
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱

牛腹瀉粘膜病毒抗原(BVDV Ag)ELISA檢測試劑盒特別注意：

1. 樣品采集后應立即檢測，如需貯存的，則應放置在冰凍條件下，避免反復凍融，檢測前應在低溫下將其溶解并完全混合

2. 如有需要，樣品可用EIA緩沖液稀釋

3. 建議試驗樣品和標準品做雙份檢測

4. 試驗樣品應在中性PH范圍內，有機溶劑的污染會影響試驗

5. 只能使用試劑盒內提供的洗滌液洗板，洗板不充足可能會導致試驗失敗

6. 倒去洗滌液，吸水紙上拍干，不能用吸水紙擦拭微孔

7. 底物液應避光保存，因其對光敏感，且要避免接觸金屬

8. 加入終止液后30min內讀數

本產品僅用于科研，不能用于臨床

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